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常见问题
一:(DNA)植物样本处理量不确定问题的解决方案
对于植物样本,样本处理量无法统一确定,对于一般样本(烟草,拟南芥等),提取量不超过100mg鲜重组织或者20mg干重组织,对于复杂样本(水稻,玉米,榆树等),建议初始样本量不超过50mg鲜重或者10mg干重组织;如果需要较高的DNA量,可以采取多管浓缩的方法提取DNA;
二:(DNA)如何处理短时间内无法低温处理的DNA样本?
对于植物样本,如果短时间不能低温处理,建议使用硅胶颗粒干燥样本,防止DNA严重降解;研磨处理材料过程中尽量不要过量,否则会导致DNA产量低;材料过量也会使样本出现团块无法裂解,导致离心柱堵塞,无法获得高质量DNA;
三:DNA提取中A260/280比值波动是什么原因
对于基因组DNA提取,A260/280值如果低于1.7说明有可能存在蛋白污染,如果值大于1.9,说明可能存在RNA污染;如果洗脱样本时没有使用Buffer EB,而使用ddH20,比值或偏低,因为Ph值会影响吸光值,并不表示样本纯度低;
四:(DNA)离心柱漂洗完成后需要注意什么
离心柱漂洗完成后,尽可能烘干柱膜上残留乙醇,残留乙醇会影响洗脱效率和下游实验效果;如果A260/230值过低,说明样本提取过程中,漂洗不彻底,有盐离子残留,建议增加漂洗次数;
五:(DNA)试剂盒中Buffer EB含微量EDTA怎样处理
试剂盒中Buffer EB中含有少量EDTA,可能影响下游实验,使用时适当稀释,如果用其他洗脱液洗脱,要确保PH>7.5,PH过低影响洗脱效率。
六:(DNA)基因组DNA样本储存需要注意什么
待提取样本尽量避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段降解或者DNA得率严重下降。
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